摘要目的 建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法定量检测iv给予盐酸千金藤素后药物在大鼠血浆和组织中的含量及其随时间变化过程,依据千金藤素肺靶部位的有效暴露量和文献报道的体外抗冠状病毒活性探讨其体内药理活性.方法 ①建立测定大鼠血浆和组织匀浆中千金藤素含量的LC-MS/MS法.采用蛋白沉淀法处理血浆和组织匀浆样品;采用Phenomenex C18(3.0 mm×50 mm,2.6 μm)色谱柱,以0.05%甲酸-2 mmol·L-1乙酸铵-水溶液和0.1%甲酸-乙腈溶液为流动相梯度洗脱(流速0.6 mL·min-1);正离子多反应监测模式检测千金藤素(m/z:607.3→365.1)和内标丁螺环酮(m/z:386.4→122.2).②6只SD大鼠单次iv给予盐酸千金藤素7.5 mg·kg-1后不同时间点采集血样,用LC-MS/MS法测定血药浓度,应用非房室模型计算药物消除半衰期(t1/2)、初始浓度(C0)、曲线下面积(AUC)、清除率(CL)和表观分布容积(V)等主要药动学参数.③72只SD大鼠随机分为2组,分别单次或多次(每24h1次,连续5d)iv给予盐酸千金藤素7.5 mg·kg-1,末次给药后0.033,0.25,4,24,72和120 h(n=6)行心脏穿刺采血,并采集组织样品,测定血浆和组织中千金藤素含量.④3只SD大鼠iv盐酸千金藤素(7.5 mg·kg-1)2 h后静脉采血测定千金藤素大鼠全血/血浆分配比(Rb/p).⑤ 平衡透析法测定千金藤素在大鼠血浆及肺组织匀浆中蛋白结合率,计算肺游离药物浓度.结果 ①建立的LC-MS/MS法在2～1 000 μg·L-1范围内线性关系良好(r2>0.999),定量下限为2 μg·L-1,经方法学验证满足定量检测要求.②大鼠单次iv给予千金藤素7.5 mg·kg-1 后主要药动学参数:C0 为(686.91±238.43)μg·L-1,t1/2为(29.70±6.29)h,Vz为(62.70±7.93)L·kg-1,Vss为(62.55±11.28)L·kg-1,CL为(1.50±0.23)L·h-1·kg-1,AUC(0-t)为(4.52±0.61)h·mg·L-1.③单次及多次iv千金藤素7.5 mg·kg-1后,组织中浓度均高于血浆,肺组织含量最高,单次和多次iv给药的AUC(0-t)分别为(2 547.35±156.56)和(4 481.35±479.21)h·mg·L-1.④经测定千金藤素在大鼠中Rb/p=3.5±0.8,提示其在血细胞中含量高于血浆.⑤经蛋白结合率校正后,肺最低游离药物浓度(95.04 μg·L-1)高于文献报道的抗新型冠状病毒活性水平(EC50=60.67 μg·L-1).结论 建立的LC-MS/MS方法可快速灵敏地定量大鼠血浆和肺组织中的千金藤素含量.iv给予盐酸千金藤素后药物的肺暴露量远远高于血浆及其他组织,为科学评估其体内药理活性提供了依据.