摘要目的 探究汉防己甲素(TET)体内外抑制甲型H1N1流感病毒活性及作用机制.方法 (1)细胞实验:①人非小细胞肺癌细胞(A549)分为TET 0(细胞对照)、5、8、10、12、14、16、18、20和25 μmol·L-1组和H1N1+TET0、1.25、2.5、5、10、20和25 μmol·L-1 组.TET 组加入相应浓度的 TET;H1N1+TET组经 H1N1感染1 h后,加入相应浓度TET.48 h后采用CCK-8法检测细胞活力.②细胞分为细胞对照组、H1N1+TET 0、2.5、5和10 μmol·L-1组,同①进行处理,24 h后实时荧光定量PCR法检测细胞中病毒基质蛋白1(M1)、血凝素(HA)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素β(IFN-β)mRNA表达水平,Western印迹法检测细胞中病毒HA、M1、神经氨酸酶(NA)、核蛋白(NP)表达水平和信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白磷酸化水平;(2)动物实验:①雄性BALB/c小鼠分为溶剂对照组、H1N1组、H1N1+磷酸奥司他韦(Ose)20 mg·kg-1组、H1N1+TET 25、50和100 mg·kg-1组.溶剂对照组和H1N1组分别ig给予溶剂(0.5％羧甲基纤维素钠),H1N1+Ose组和H1N1+TET 25、50和100 mg·kg-1组分别ig给予相应浓度药物.各组小鼠连续预给药3d后,除溶剂对照组外,其他组滴鼻H1N1建立流感病毒感染小鼠模型.感染后连续15 d监测小鼠生存率和体重.②分组和处理同①,于H1N1感染的第3d和第5d,处死小鼠,实时荧光定量PCR法检测小鼠肺组织M1、HA、IL-6、TNF-α和IFN-β mRNA表达水平,Western印迹法检测小鼠肺组织中HA、M1、NA、NP蛋白表达水平和STAT3蛋白磷酸化水平,HE染色观察小鼠肺组织病理变化,ELISA检测肺泡灌洗液中细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-β分泌水平.结果 (1)①TET对A549细胞的半数抑制浓度为18.06 μmol·L-1;与H1N1组相比,TET2.5、5和10μmol·L-1可显著提高细胞活力.②与H1N1组相比,TET2.5、5和10 μmol·L-1可显著降低H1N1感染A549细胞中病毒M1、HA mRNA表达及HA、M1和NA蛋白表达;TET 2.5,5 和 10 μmol·L-1 可显著降低 H1N1 感染 A549 细胞 IL-6、TNF-α和 IFN-β mRNA表达;TET 5和10 μmol·L-1可显著降低STAT3蛋白磷酸化水平;(2)①与H1N1组相比,TET 50 mg·kg-1显著提高H1N1感染小鼠的存活率;TET 25 mg·kg-1显著增加H1N1感染小鼠体重.② 与H1N1组相比,TET 50 mg·kg-1显著降低H1N1感染小鼠肺组织中HA和M1 mRNA表达及HA、M1、NA和NP蛋白表达;显著降低H1N1感染小鼠的肺指数,改善肺组织炎性病变,显著降低肺组织中IL-6、TNF-α和IFN-β mRNA表达,及肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α和IFN-β分泌水平;显著抑制H1N1感染小鼠肺组织中STAT3蛋白磷酸化水平.结论 TET在体内外均具有显著抑制H1N1感染作用,其机制可能与抑制IL-6/STAT3通路和H1N1引起的炎症反应有关.