摘要目的 构建负载磷脂酶A2(PLA2)抑制剂和铜掺杂碳量子点(Cu-CDs)的复合微针系统,并评价其对氮芥化合物2-氯乙基乙基硫醚(CEES)致伤和细菌感染的复合皮肤创面的治疗作用.方法 ① 微针制备与表征:将PLA2抑制剂伐瑞拉迪与Cu-CDs共载于透明质酸基质中,经模板法制备复合微针.采用光学显微镜、扫描电子显微镜观察微针形态;通过小鼠背部皮肤刺入实验评估微针的溶解性能和生物安全性;利用透射电子显微镜及Zeta电位分析仪对Cu-CDs进行表征.② 体外抗菌实验:将Cu-CDs 0.1、1、10、50、100和200 mg·L-1分别与大肠杆菌(EC)或金黄色葡萄球菌(SA)共培养,通过平板计数法评估其抗菌效果.③ 体外抗炎与抗毒实验:采用CCK-8法筛选CEES 1.5、3、6、12和24 mmol·L-1对人永生化角质形成细胞(HaCaT)的损伤浓度,以此作为细胞损伤模型浓度,并考察伐瑞拉迪62.5、125、250和500 μmol·L-1干预后的细胞存活率;采用ELISA检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.④ 体内药效学评价:小鼠随机分为染菌组(EC或SA)、染毒组(CEES 150 μL·kg-1,背部覆膜法染毒)、染菌染毒组(CEES-EC或CEES-SA,染菌24 h后染毒)、染毒给药组(CEES-T,染毒后用微针处理创面)、染菌染毒给药组(CEES-EC-T或CEES-SA-T,染菌染毒后用微针处理创面).分别于染菌第3、5、7、9和11天记录各组的创面面积;于第7和12天检测其创面血流量;于第12天通过革兰氏染色观察抗菌情况,并采用HE染色和免疫荧光染色进行病理评价;于第3、5、7和9天记录CEES-SA和CEES-SA-T组创面面积,并于第7天检测其创面血流量.结果 ① 成功制备形貌均一的方锥形复合微针,针高约1.2 mm,具有良好的溶解性与生物安全性.② Cu-CDs 100 mg·L-1对2种测试菌均呈现抑菌效果.③ CEES 3 mmol·L-1时HaCaT细胞存活率降至60%左右,而伐瑞拉迪500 μmol·L-1干预可使细胞存活率恢复至对照水平,并显著降低炎症因子IL-6和IL-1β水平.④ 在EC与SA感染的皮肤复合模型中,载药微针治疗组的创面愈合速度均显著快于相应染菌染毒组.第12天,CEES-T组和CEES-EC-T组创面血流量明显高于CEES组、EC组和CEES-EC组.第7和9天,CEES-T组和CEES-EC-T组创面面积较CEES-EC组均显著减小;第11天,CEES-EC-T组创面面积与CEES-EC组相比显著减小.革兰氏染色结果显示,CEES-EC组皮肤创伤部位可见大量红色阳性区域,CEES-EC-T组无明显红色.与CEES、EC和CEES-EC组相比,CEES-T和CEES-EC-T组皮肤组织中炎症因子IL-6表达明显降低,Ⅰ型胶原蛋白含量升高.与CEES-SA组相比,第7和9天CEES-SA-T组创面面积显著减小,创面血流量明显增加.结论 本研究成功构建了共载PLA2抑制剂与Cu-CDs的复合微针系统,该微针通过协同抗炎与抗菌作用,显著促进CEES损伤和细菌感染的复合皮肤创面愈合.