摘要目的 构建单核细胞靶向肽(MP)修饰的载甲泼尼龙(MPS)脂质体(MP-MPS-Lipo),并评价其对急性肺损伤(ALI)的靶向治疗效果及安全性.方法 ① 制备与表征:采用薄膜分散法制备MP-MPS-Lipo,并通过动态光散射法表征其粒径、多分散指数及zeta电位;采用超滤离心法分离MP-MPS-Lipo中的游离MPS,采用超高效液相色谱(UPLC)法定量分析MPS含量,计算包封率和载药量.采用动态光散射法考察MP-MPS-Lipo在模拟血清中的胶体稳定性,透析法结合UPLC评价体外释药行为,CCK-8法检测体外细胞毒性.② 体外炎性单核细胞摄取:建立脂多糖(LPS)100 μg·L-1及干扰素γ(IFN-γ)20 μg·L-1共同诱导的WEHI 274.1炎性单核细胞模型,细胞分为对照组、罗丹明B(RhB)标记普通脂质体(RhB-Lipo)组、RhB 标记聚乙二醇化脂质体(RhB-PEG-Lipo)组和RhB标记靶向肽脂质体(RhB-MP-Lipo)组.所有脂质体均使用1%RhB进行标记.利用流式细胞术检测各组细胞的阳性百分率.加入C-C趋化因子受体2(CCR2)拮抗剂RS504393 50 μg·L-1进行受体封闭实验验证靶向机制.③ RhB-MP-Lipo在ALI小鼠体内组织分布:气管滴注LPS 5 mg·kg-1构建BALB/c小鼠ALI模型.模型小鼠分别尾静脉注射RhB标记的脂质体(RhB-Lipo、RhB-PEG-Lipo、RhB-MP-Lipo,RhB剂量为100 μg·kg-1),4 h后利用离体器官荧光成像分析心、肝、脾、肺、肾的荧光强度,并计算肺/肝荧光比值以评价组织分布特征.④ MP-MPS-Lipo在ALI小鼠体内的药效和安全性:小鼠随机分为对照组、模型组、模型+MPS组、模型+PEG-MPS-Lipo组和模型+MP-MPS-Lipo组.造模6h后,各给药组尾静脉注射相应药物(按MPS 1 mg·kg-1计),对照组与模型组注射等体积生理盐水.首次给药24 h后以相同剂量重复给药1次,共给药2次.造模48 h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)、血清和心、肝、脾、肺、肾.流式细胞仪检测BALF中总细胞及中性粒细胞数,ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和IL-10水平.HE染色观察肺组织病理损伤,免疫荧光法检测肺组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达.⑤ 小鼠随机分为对照组、MPS组、PEG-MPS-Lipo组和MP-MPS-Lipo组.各给药组小鼠经尾静脉连续注射相应药物,连续给药7 d.对照组小鼠则经尾静脉注射等体积生理盐水.于末次给药24 h后(即第8天),取血清和心、肝、脾、肺、肾,HE法观察心、肝、脾、肺、肾的病理变化,测定血清生化指标(谷氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、高密度脂蛋白胆固醇、尿酸及肌酐)水平以评估小鼠的肝功能、肾功能及脂质代谢状态.结果 ① MP-MPS-Lipo平均粒径为(84.9±3.2)nm,多分散指数为(0.19±0.03),zeta电位为(-10.0±0.2)mV;包封率为(88.41±0.03)%,载药量为(11.88±0.03)%;在血清中48 h内平均粒径维持在100～110 nm;体外模拟释药中,4 h释放率为(8.10±0.03)%,96 h释放率为(54.23±0.50)%;MPS≤2 g·L-1时单核细胞和内皮细胞存活率均>80%.② RhB-MP-Lipo组单核细胞摄取阳性率为(75.83±2.01)%,显著高于RhB-PEG-Lipo组;经CCR2拮抗剂预处理后,其细胞摄取水平显著降低.③ 给药4h后,RhB-MP-Lipo组肺/肝荧光强度比值为0.48±0.11,约为RhB-PEG-Lipo组的2倍.④ 与LPS模型组相比,模型+MP-MPS-Lipo组BALF中性粒细胞比例显著下降,促炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β浓度显著降低,抗炎因子IL-10浓度显著增加;肺泡结构基本恢复正常,iNOS荧光信号减弱.⑤ 各给药组心、肝、脾、肺、肾均未见明显毒性病理改变,血清生化指标正常.结论 MP修饰显著增强脂质体的单核细胞摄取水平及其在ALI小鼠肺部的蓄积,有效提升MPS的抗炎效果.