ELISA法测定半夏及其炮制品中半夏凝集素含量

Determination of Pinellia ternata lectin in Pinelliae Rhizoma and its processed products by ELISA

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摘要目的:研究双抗夹心酶联免疫ELISA法作为半夏及其炮制品中毒蛋白半夏凝集素蛋白(Pinelliaterna-ta lectin,PTL)检查方法的可行性.方法:采用双抗夹心ELISA法,测定半夏不同炮制品中PTL含量.结果:方法学考察结果显示,非线性四参数曲线拟合相关系数r2=0.999 9,表明当PTL浓度在0.075～4.80 ng·mL-1浓度范围内,以非线性四参数拟合曲线计算PTL含量的准确度高,且方法精密度、稳定性、重复性较好.26批半夏生品及75批半夏炮制品(清半夏、法半夏、姜半夏各25批)中半夏中PTL含量均值为30.9 mg·g-1,其炮制品清半夏、法半夏、姜半夏中PTL含量均值分别为0.92 mg·g-1,48.80 μg·g-1,130.32 ng·g-1,表明炮制后PTL含量显著下降,姜半夏中PTL含量最低,其次为法半夏,清半夏含量最高.同时建立半夏不同饮片中内源性毒性蛋白凝集素蛋白限度检查方法,建议清半夏、法半夏、姜半夏中PTL含量分别不超过2.70 mg·g-1、160.0 μg·g-1、510.0 ng·g-1.结论:ELISA法测定半夏凝集素蛋白准确可靠,且成本低,可快速批量测定,可以作为半夏及其炮制品中PTL检查方法.

作者郁红礼 ^[1] 谢雨薇 ^[2] 吴皓 ^[1] 王迅 ^[3] 刘冰冰 ^[1] 崔小兵 ^[2] 张萍 ^[4] 许艳青 ^[2] 学术成果认领

作者单位南京中医药大学药学院,南京210023;江苏省中药炮制重点实验室,南京210023;中华人民共和国教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心,南京210023 ^[1] 南京中医药大学药学院,南京210023 ^[2] 南京中医药大学附属医院江苏省中医院,南京210029 ^[3] 中国食品药品检定研究院,北京100050 ^[4]

关键词半夏半夏凝集素有毒物质控制含量测定 ELISA 炮制

分类号 R921.2

栏目名称

中药炮制规范

DOI 10.19778/j.chp.2023.03.006

发布时间 2023-07-13

基金项目

国家重点研发计划（2018YF1707000）；国家自然科学基金（81173549）