基于SPR技术的抗CD80生物技术药物结合活性方法的建立

Establishment of anti CD80 drug binding activity method based on SPR technology

二维码有效期 120s

摘要目的基于表面等离子共振(SPR)技术建立抗CD80 生物技术药物结合活性方法,并进行方法学验证和样品测定.方法通过优化试验条件建立合适的结合活性方法,并选择合适的数据分析模型后对建立的方法进行方法学验证.结果通过对各种条件进行筛选及耐用性考察,确定了方法的试验参数:配体固定条件为pH 5.0 的醋酸盐缓冲液,固定量为 400～5000 RU,结合和解离速率为 10～50μL·min-1,芯片的再生条件为pH 4.0 的枸橼酸缓冲液(10 mmol·L-1 枸橼酸钠,100 mmol·L-1 NaCl),响应参数为稳态相对响应值(在进样结束后 10 s范围内窗口的平均响应值),数据模型为四参数模型.根据以上参数建立了基于SPR技术抗CD80 生物技术药物结合活性方法.验证结果如下:线性回归方程的决定系数为0.9994;每个效价水平相对效价测定值的相对偏倚平均值为-0.66%～0.64%,线性回归方程的斜率为 0.9867;每个效价水平 6 次独立测试结果的几何变异系数为 0.7%～1.5%,范围为 64%～156%.各项验证指标均满足相关验证要求,专属性结果也较好.将建立的结合活性方法应用于抗CD80 生物技术药物,测得结合活性相对效价为 100%.结论本研究通过优化试验条件建立了基于SPR技术的抗CD80 生物技术药物结合活性方法,该方法专属性强、重复性好、准确度高.