卵泡刺激素对人卵巢颗粒KGN细胞TGF-β信号传导的影响
Effects of follicle stimulating hormone on TGF-β signal transduction in human ovarian granulosa KGN cells
摘要目的 利用抗体芯片技术考察卵泡刺激素(FSH)在不同时间上对卵巢颗粒细胞(KGN)转化生长因子β(TGF-β)信号通路的影响.方法 FSH分别刺激KGN细胞3、6、12、24、48、72 h后收集细胞,进行不同时间点的蛋白磷酸化水平差异含量考察,对蛋白磷酸化水平差异进行GO功能注释和KEGG信号通路富集分析.结果 FSH可以介导TGF-β通路的传导,促进颗粒细胞的DNA合成.FSH作用KGN细胞3、12 h后,TGF-β通路下游因子Smad蛋白磷酸化水平升高;GO富集分析发现,磷酸化Smad参与如复合物组装、信号转导等功能.作用24 h和48 h时对丝裂原活化蛋白激酶通路正向调节,其下游因子环AMP依赖性转录因子2、c-Jun、c-Fos等蛋白磷酸化程度增加,表明除了与Smad依赖型TGF-β通路有关,也上调了非Smad依赖型TGF-β通路.12 h后可观察到抑制性I-Smad功能富集,说明其开始对TGF-β通路进行负调控,与R-Smad竞争性结合,阻断TGF-β信号传导;随着FSH作用的时间增加,对TGF-β信号通路的影响也逐渐变小.结论 FSH可以介导KGN细胞内TGF-β信号通路的传导,促进后续的系列反应.
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