基于PTEN/PI3K/AKT通路探讨miR-29a对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响
Effects of miR-29a on proliferation and apoptosis of ovarian cancer cells based on PTEN/PI3K/AKT pathway
摘要目的 基于第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PTEN/PI3K/AKT)通路探讨微小RNA-29a(miR-29a)对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 体外培养人卵巢癌细胞A2780细胞,分为对照组(不转染)、siRNA NC组(转染nonsense siRNA)、miR-29a siRNA组(转染miR-29a siRNA)、mimic NC组(转染negative control-miR-29a)和miR-29a mimic组(转染miR-29a mimic).采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组A2780细胞中miR-29a、PTEN mRNA表达情况;采用CCK-8法及显微镜检测各组A2780细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组A2780细胞凋亡情况;蛋白印迹法(WB)检测各组A2780细胞中PTEN/PI3K/AKT通路相关蛋白表达情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-29a与PTEN的靶向作用关系.结果 与对照组、siRNA NC组相比,miR-29a siRNA组A2780细胞中miR-29a表达水平、p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT蛋白表达水平、细胞OD值降低(P<0.05),PTEN mRNA及蛋白表达水平、细胞凋亡率升高(P<0.05);与对照组、mimic NC组相比,miR-29a mimic组A2780细胞中miR-29a水平、p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT蛋白水平、细胞OD值升高(P<0.05),PTEN mRNA及蛋白水平、细胞凋亡率降低(P<0.05).miR-29a与PTEN基因存在靶向关系.结论 miR-29a对卵巢癌A2780细胞具有促进增殖、抑制凋亡的作用,可能是通过靶向下调PTEN表达并激活PI3K/AKT通路发挥作用的.
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