lncRNA NEAT1调节miR-802/TRPM7轴对宫颈癌细胞迁移、侵袭、凋亡及EMT的影响

lncRNA NEAT1 regulates the migration,invasion,apoptosis and EMT of cervical cancer cells through the miR-802/TRPM7 axis

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摘要目的探讨lncRNANEAT1调节miR-802/TRPM7轴对宫颈癌细胞迁移、侵袭、凋亡及EMT的影响.方法将Siha 细胞分为 Control 组(不进行任何转染)、si-NC 组(转染 si-NC)、si-NEAT1 组(转染 si-NEAT1)、si-NEAT1+in-miR-802组(转染 si-NEAT1+miR-802inhibitor)、si-NEAT1+TRPM7 组(转染 si-NEAT1+pcDNA3.1-TRPM7)、miR-NC 组(转染miR-NC)和 miR-802mimics 组(转染 miR-802mimics),qRT-PCR 检测宫颈癌组织和细胞系中 NEAT1、miR-802 和 TRPM7 mRNA的表达,Transwell实验检测细胞侵袭,细胞划痕实验检测细胞迁移,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测 E-cadherin 和 Vimentin 蛋白的表达,通过 StarBase 和 Targetscan 数据库预测 NEAT1 与 miR-802、miR-802 与 TRPM7之间的结合位点.双荧光素酶报告检测NEAT1与miR-802、miR-802与TRPM7的靶向关系.结果与癌旁组织相比,癌组织中NEAT1和TRPM7的表达显著升高(P＜0.05),miR-802表达明显降低(P＜0.05);与人正常宫颈HaCat细胞相比,宫颈癌细胞系Siha、HeLa、C33A、ME180、HEK-293T和Caski细胞中NEAT1和TRPM7的表达明显升高,miR-802的表达显著降低(P＜0.05);与Control组和si-NC组相比,si-NEAT1组的宫颈癌Siha细胞划痕愈合率和侵袭数量明显降低,凋亡率明显升高(P＜0.05);与si-NEAT1组相比,si-NEAT1+in-miR-802组和si-NEAT1+TRPM7组的宫颈癌Siha细胞划痕愈合率和侵袭数量显著升高,凋亡率显著降低(P＜0.05);与Control组和si-NC组相比,si-NEAT1组的宫颈癌Siha细胞中E-cadherin蛋白表达明显升高,Vimentin蛋白表达降低(P＜0.05),与si-NEAT1组相比,si-NEAT1+in-miR-802组和si-NEAT1+TRPM7组的宫颈癌Siha细胞中E-cadherin蛋白表达显著降低,Vimentin蛋白表达明显升高(P＜0.05).结论 NEAT1在宫颈癌中高表达,敲低其表达可抑制宫颈癌细胞的迁移、侵袭和EMT,促进凋亡.NEAT1可能通过与miR-802相互作用调控TRPM7的表达从而发挥作用.