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流式细胞术估测绞股蓝倍性和基因组大小方法的建立及应用

Establishment and Application of a Method for Ploidy and Genome Size Estimation of Gynostemma pentaphyllum Using Flow Cytometry

摘要目的:建立绞股蓝流式细胞术的倍性和基因组大小检测方法.方法:通过比较不同细胞核提取液、过滤方式、取样部位及电压条件,筛选出绞股蓝倍性检测最佳方案,并以二倍体为参照,完成对42份种质资源的倍性与基因组大小检测.结果:以绞股蓝嫩叶为材料,用LB01细胞核提取液进行细胞核提取,经70 μm细胞筛过滤后在422 V电压条件下进行倍性检测的效果最佳.42份绞股蓝种质共检测出二倍体18份、四倍体20份、六倍体4份.不同种质绞股蓝的基因组大小存在较大差异,基因组大小在513.25~1 294.86 Mb之间.结论:基于流式细胞术建立了绞股蓝倍性鉴定和基因组大小评估方法,为绞股蓝种质资源鉴定及种质创新利用提供了技术支持.

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