超滤结合UHPLC-UV法测定川楝素在SD大鼠和新西兰兔中的血浆蛋白结合率
Determination of Plasma Protein Binding Rate of Toosendanin in SD Rats and New Zealand Rabbits by Ultrafiltration Combined with UHPLC-UV
摘要目的:建立川楝素血浆蛋白结合率的测定方法.方法:采用截止值为10K的超滤管对SD大鼠和新西兰兔血浆中结合型与游离型的川楝素进行分离,以Waters UPLC BEH ? C18(2.1 mm × 100 mm,1.7 μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸(31∶69)流动相进行等度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,柱温为25 ℃,检测波长为210 nm,进样量为2μL.结果:川楝素在1~50 μg·mL-1内呈现良好的线性关系,定量下限为0.5μg·mL-1,方法学考察结果均符合要求.SD大鼠血浆中3个浓度川楝素(5、10、20μg·mL-1)的血浆蛋白结合率分别为(77.01±3.45)%,(81.30±1.34)%,(83.89±2.78)%;新西兰兔血浆中3个浓度川楝素的血浆蛋白结合率分别为(64.09±4.66)%,(71.55±3.16)%,(73.48±3.28)%.结论:在体外川楝素蛋白结合率随着川楝素浓度的升高未呈现浓度依赖性,结合率未受到种属的影响,在SD大鼠和新西兰兔血浆中蛋白结合率差异较小.
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