高效液相-柱后衍生化法同时测定双氢青蒿素和哌喹
HPLC with post-column derivatization for simultaneous determination of dihydroartemisinine and piperaquine
摘要目的 建立同时测定双氢青蒿素和哌喹的方法.方法 采用反相高效液相-柱后衍生化-紫外检测法,流动相为乙腈∶甲醇∶醋酸钠缓冲液(65∶20∶15,pH 4.0),流速0.8 ml/min;衍生化试剂为1 mol/L KOH的900%乙醇溶液,流速0.3 ml/min;衍生化反应体系包括三通阀和6 m长的聚醚醚酮管以及超级恒温水浴,流动相所载药物在柱后与衍生试剂经过三通实现混合后在70℃水浴的聚醚醚酮管中反应1 min,然后进入检测器;柱温35℃,检测波长289 nm.结果 双氢青蒿素在3.0~300 μmol/L范围内线性关系良好,以峰面积对双氢青蒿素浓度进行线性回归,方程为A=3544.3C+3846.4,r=0.9999;同时,哌喹在6.8~680μmol/L范围内线性关系良好,以峰面积对哌喹浓度进行线性回归,方程为A=7217.1C+28 115,r=0.9996;对两种药物测定的日内、日间精密度相对平均偏差(RSD)均小于2%;平均回收率均在98%~102%之间.结论 该方法的灵敏度、精密度、准确性及重现性均符合药典要求,可为各种复方制剂中双氢青蒿素及哌喹的质量控制提供依据.
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