双黄连注射剂中1,5-二咖啡酰奎宁酸致敏家兔后血清中特异性抗体的测定
Determination of specific antibodies in the serum of rabbits sensitized by 1,5-dicaffeoylquinic acid in Shuanghuanglian Injection
摘要目的 检测双黄连注射剂中1,5-二咖啡酰奎宁酸致敏家兔后血清中特异性抗体效价.方法 双黄连注射剂中疑似小分子半抗原物质1,5-二咖啡酰奎宁酸与正常家兔血清体外孵育制备完全抗原,免疫家兔获得特异性抗体.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗血清的抗体效价.间接竞争ELISA测定血清特异性并绘制抑制曲线.采用兔免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒检测各组家兔抗血清中IgE抗体的含量.结果 1,5-二咖啡酰奎宁酸浓度分别为 0.25 mg/ml、0.50 mg/ml、1.00 mg/ml、2.00 mg/ml、4.00 mg/ml 时效价[吸光度(4 值)]对应的分别为 0.364±0.020、0.334±0.010、0.322±0.020、0.332±0.010、0.298±0.020,均高于阴性对照组A 值(0.095±0.010).得到回归方程 I=0.195 2 lgC+0.273 4,R2=0.995 8,半数抑制浓度(IC50)=33.494 mg/ml.家兔体内产生了外源性IgE型抗体.结论 在本实验条件下双黄连注射剂中疑似半抗原物质1,5-二咖啡酰奎宁酸具有致敏性.
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