摘要目的 构建以类弹性蛋白(elastin-like polypeptide,ELP)和白蛋白结合结构域(albumin-binding domain,ABD)为载体的胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)受体激动剂并探究其降血糖作用.方法 通过基因融合的方式,将GLP-1与ELP及ABD融合,构建GLP-ELPAGV及GLP-ELPAGV-ABD融合蛋白.以大鼠胰岛素瘤细胞(RINm-5F)为研究对象,考察不同浓度的GLP-1阳性对照分子、GLP-ELPAGV-ABD及GLP-ELPAGV融合蛋白的促细胞增殖活性.通过测定RIN-m5F细胞内环磷酸腺苷的量表征融合蛋白对胰高血糖素样肽1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)亲和力的影响.利用ELISA的方式检测融合蛋白与人血清白蛋白的亲和力.使用C57BL/6小鼠,通过皮下注射融合蛋白后在不同时间点测定血糖水平,研究其体内降血糖活性.结果 体外细胞实验显示,在100 nmol·L-1范围内,GLP-1、GLP-ELPAGV-ABD及GLP-ELPAGV融合蛋白均能促进细胞增殖,且随着浓度的增加促增殖能力增加,差异无统计学意义(100 nmol·L-1时,3组比较F=0.985,P=0.089).在1～10 nmol·L-1范围内,GLP-ELPAGV及GLP-ELPAGV-ABD融合蛋白与GLP-1R结合的亲和力均下降,10 nmol·L-1时,GLP-ELPAGV-ABD组与GLP-1组、GLP-ELPAGV组与GLP-1组比较,差异均有统计学意义(t=4.542,P=0.004,t=7.987,P<0.001).ELISA结果显示,GLP-ELPAGV-ABD融合蛋白与人血清白蛋白有较高的亲和力.体内实验显示,GLP-ELPAGV及GLP-ELPAGV-ABD融合蛋白能够降低小鼠的血糖水平达72 h和96 h,比GLP-1(1 h)明显延长.72 h时GLP-ELPAGV组与PBS组、96 h时GLP-ELPAGV-ABD组与PBS组比较,差异均有统计学意义(t=3.811,P=0.008;t=3.559,P=0.003).结论 GLP-ELPAGV及GLP-ELPAGV-ABD融合蛋白可以延长GLP-1的半衰期和降血糖时间,ELP与ABD可以协同发挥作用增强GLP-1的降血糖活性.