体内外实验探讨千斤拔多糖对类风湿关节炎模型小鼠免疫调节的作用
Clinical and experimental investigations into the immune modulatory effects of Qianjinba polysaccharides on a rheumatoid arthritis mouse model:in vivo and in vitro studies
摘要千斤拔为豆科植物蔓性千斤拔的干燥根,其成分植物多糖具有抗炎、镇痛、保护周围神经损伤等作用,免疫调节的作用少有报道.本研究通过观察千斤拔多糖(QJBDT)对类风湿关节炎模型小鼠免疫调节的作用,初步探讨其抑制类风湿关节炎的作用机制.体外实验将巨噬RAW264.7细胞经过细菌脂多糖(LPS)诱导,用不同浓度的千斤拔多糖或白芍总苷(TGP)处理.细胞分为正常组,模型组,QJBDT低、中、高剂量组,阳性对照组,检测各组细胞的增殖情况;提取细胞蛋白,检测细胞中丝裂原活化蛋白激酶p38与核因子NF-κB蛋白的表达情况.体内实验小鼠致炎造模,造模成功后给予不同浓度千斤拔多糖和白芍总苷灌胃,每天给药1次,连续21天.小鼠分为正常组,模型组,QJBDT低、中、高剂量组,阳性对照组(TGP组),每组10只.计算各组脏器指数;检测血细胞中免疫指标;流式细胞术检测T细胞17(T helper cell 17,Th17)和调节性T细胞Treg的变化.结果发现,与正常组相比,各组细胞增值率明显提高(P<0.05);模型组、QJBDT低剂量组和QJBDT中剂量组细胞中p38、NF-κB蛋白表达增强(P<0.05);血细胞中系统性免疫性炎症指数(SII)、全身炎症反应指数(AISI)、血小板淋巴细胞比值(PLR)、中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)、单核细胞淋巴细胞比值(MLR)升高(P<0.05);模型组和千斤拔低剂量组的小鼠体重、胸腺指数、脾脏指数及肝脏指数降低(P<0.05);同时各组小鼠全血中Th17升高,调节性T细胞Treg降低(P<0.05),模型组和千斤拔低剂量组Th17与Treg比值增高(P<0.05).与模型组相比,QJBDT中剂量、QJBDT高剂量组和TGP组抑制细胞增殖效果明显(P<0.05);同时降低蛋白P38、NF-κB的表达(P<0.05);血常规部分免疫指标不同程度降低(P<0.05);各免疫器官指数升高(P<0.05);QJBDT低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠Th17降低,Treg升高,Th17与Treg比值降低(P<0.05),且QJBDT高剂量组作用与TGP组无统计学差异(P>0.05).本研究发现千斤拔多糖对类风湿关节炎小鼠有较好的免疫调节作用且作用成剂量依赖性,作用机制可能是通过抑制p38 MAPK信号通路抑制NF-κB活化发挥作用.
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