结核分枝杆菌膜囊泡RNA表达谱分析及功能研究
RNA profiling and functional study of mycobacterium tuberculosis membrane vesicles
摘要目的 描绘结核分枝杆菌膜囊泡(mycobacterium tuberculosis membrane vesicles,MVs)的RNA特征表达谱,分析其主要的生物功能,初步探索其诱导巨噬细胞凋亡的作用.方法 分离结核分枝杆菌MVs,提取总RNA,采用illu-mina Hiseq 2500-SE50平台进行双端测序.使用BWA软件进行序列比对,通过COG数据库对基因进行功能注释.通过MTT试验检测细胞存活率,采用Annexin-V联合PI染色法检测细胞凋亡.结果 本研究通过RNA测序及生物信息学分析描绘了结核分枝杆菌MVs中RNA的种类及含量,COG数据库功能注释结果显示这些RNA主要富集的生物学功能包括脂质转运代谢、氨基酸转运代谢、能量产生与转化、次级代谢物合成转运与代谢和转录等.生物分析显示富集的主要功能包括脂质转运代谢、氨基酸转运代谢、能量产生与转化、次级代谢物合成转运与代谢和转录等.功能实验表明,结核分枝杆菌MVs可以降低THP-1源巨噬细胞的存活率,促进细胞凋亡.结论 结核分枝杆菌MVs中含有丰富的短片段RNA,具有诱发细胞凋亡的作用.然而其具体作用机制仍需要更深入细致的研究.
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