摘要目的 探讨血管紧张素(angiotensin,Ang)1-7/Mas受体(Mas receptor,MasR)轴在围手术期神经认知障碍(perioperative neurocognitive disorders,PND)背景下调控海马神经元α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)表达的作用及可能机制.方法 采用脂多糖诱导巨噬细胞获得条件培养基(conditioned medium,CM)刺激小鼠海马神经元细胞系 HT22,模拟麻醉手术诱导的中枢神经炎症状态.将细胞分为对照组(Con组)、CM 模型组、CM+Ang 1-7类似物 AVE 0991干预组(CM+AVE干预组)、CM+AVE 0991+MasR拮抗剂 A779干预组(CM+AVE+A779干预组)、CM+AVE 0991+PP2A基因敲减阴性对照(small interfering negative control,siNC)组(CM+AVE+siNC组)及CM+AVE 0991+小干扰RNA介导的蛋白磷酸酶2A基因敲减(small interfering RNA for protein phosphatase 2A,siPP2A)组(CM+AVE+siPP2A组);除Con组外,HT22细胞分别接受CM 刺激,其中CM+AVE干预组同时给予最佳剂量的 AVE 0991干预;CM+AVE+A779干预组给予10-5 mol/L A779预处理30 min后,再加入CM+AVE 0991干 预;CM+AVE+siNC组在HT22细胞中转染阴性对照siRNA后,接受CM+AVE 0991干预;CM+AVE+siPP2A组予以敲减 HT22细胞PP2A表达,再加入CM+AVE 0991干预.通过细胞计数试剂盒-8法检测细胞活力,采用ELISA检测 Ang 1-7水平,通过斑点印迹检测α-syn蛋白表达水平,蛋白质印迹检测 MasR、PP2A催化亚基(PP2A-C)、甲基化PP2A(methylated-PP2A,Me-PP2A)、129位丝氨酸磷酸化α-syn(serine 129-phosphorylated α-syn,pS129-α-syn)的蛋白表达水平.结果 CM 刺激可能致 HT22细胞总α-syn及pS129-α-syn的蛋白表达水平显著上调(P<0.05).CM 刺激6 h可显著抑制 HT22细胞 Ang 1-7/MasR轴活性,表现为 MasR蛋白表达下调,同时伴随PP2A-C及 Me-PP2A蛋白水平降低(P<0.05).剂量梯度实验提示10-6 mol/L为AVE 0991上调 MasR、PP2A-C及 Me-PP2A蛋白水平的最佳剂量,该剂量下可以显著减少α-syn及pS129-α-syn的表达水平(P<0.05);上述保护作用可被 MasR拮抗剂 A779或特异性敲减PP2A所阻断.结论 CM 刺激小鼠海马神经元 HT22细胞可能致 Ang 1-7/MasR轴的活性抑制及α-syn的表达增加;Ang 1-7外源性模拟物 AVE 0991通过上调PP2A表达及其甲基化,进而下调α-syn的表达,提示其可能参与了PND的病理过程,为解析PND的发病机制提供了新的实验线索和潜在干预靶点.