ER-α-ERK5信号通路介导流体剪切力促进MC3T3-E1细胞增殖

Proliferation of MC3T3-E1 cells promoted by fluid shear stress via ER-α-ERK5 signaling pathway

摘要目的:研究雌激素受体α(ER-α)在流体剪切力促进细胞外信号调节激酶5(ERK5)活化以及ER-α-ERK信号通路在成骨细胞增殖中的具体分子机制.方法:给予成骨MC3T3-E1细胞孵育特异性ER-α-抑制剂MPP(methyl-piperidino-pyrazole,1μmol/L),孵育高选择性ERK5活性抑制剂XMD8-92(5 μmol/L),和/或加载12 dyn/cm2流体剪切力处理.采用MTT实验检测成骨细胞的增殖活性,采用蛋白免疫印记实验检测ER-α、P-ERK5、ERK5、CyclinD1(细胞周期蛋白)和CDK4(细胞周期蛋白依赖性激酶)蛋白的表达水平.结果:生理强度(12 dyn/cm2)的流体剪切力作用于成骨MC3T3-E1细胞60 min后能显著促进成骨细胞增殖,促进CyclinD1和CDK4的表达;同时ER-α和P-ERK5的表达显著增加.成骨细胞孵育MPP抑制ER-α后,P-ERK5的表达显著下降,CyclinD1和CDK4表达也显著降低.孵育XMD8-92抑制ERK5活性后,流体剪切力促进成骨细胞中CyclinD1和CDK4表达水平显著下降.结论:流体剪切力通过ER-α-ERK5信号通路上调CyclinD1和CDK4的表达水平,最终导致成骨MC3T3-E1细胞增殖.