抗肿瘤天然产物Garcinone E抑制卵巢癌细胞自噬流的机制研究
A study on mechanism of anti-tumor natural product Garcinone E inhibiting autophagic flux in ovarian cancer cells
摘要目的 探讨抗肿瘤天然产物Garcinone E对卵巢癌细胞自噬功能的影响及作用机制.方法 选择卵巢癌细胞HeyA8和SKOV3进行实验.以不同浓度Garcinone E对卵巢癌细胞进行干预,采用CCK-8实验检测细胞活力,通过单丹磺酰尸胺(MDC)染色实验检测细胞自噬小体形成情况.构建稳定表达stubRFP-sensGFP-LC3慢病毒的HeyA8细胞和SKOV3细胞,检测细胞自噬流变化.通过溶酶体染色实验检测卵巢癌细胞溶酶体与sensGFP-LC3共定位情况.应用Western blot实验检测卵巢癌细胞细胞周期相关蛋白p21、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、周期蛋白依赖性激酶7(CDK7)、蛋白激酶B(Akt)、微管相关蛋白1-轻链3B(LC3B)和自噬相关蛋白p62的表达水平.结果 经Garcinone E干预后,卵巢癌细胞活力显著下降(P<0.05),其对HeyA8细胞、SKOV3细胞的半数抑制量(IC50)分别为5.93 μmol/L、8.14 μmol/L.MDC染色实验发现,经Garcinone E干预后,卵巢癌细胞内自噬小体数量增加.荧光显微镜下发现Garcinone E阻断稳定转染stubRFP-sensGFP-LC3慢病毒的HeyA8细胞和SKOV3细胞的自噬流.溶酶体染色实验结果显示Garcinone E阻断了自噬小体与溶酶体的结合.Western blot实验结果显示,Garcinone E干预可上调卵巢癌细胞LC3B、p62和p21的蛋白表达水平(P<0.05),下调Akt、CDK4和CDK7的蛋白表达水平(P<0.05).结论 Garcinone E能够抑制卵巢癌细胞的自噬流,阻滞细胞周期,具有抗卵巢癌的作用,有作为卵巢癌化疗药物研发先导药物的潜力.
更多相关知识
- 浏览7
- 被引0
- 下载0

相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文


换一批



