核酸质谱技术快速鉴定肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因型的应用价值研究
A study on application value of mass spectrometry nucleic acid detection technology in rapid identification of carbapenemase genotypes in Klebsiella pneumoniae
摘要目的 建立基于核酸质谱技术快速鉴定肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因型的方法.方法 收集2021年1月至2023年9月徐州医科大学附属医院分离的56株非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP),通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术和VITEK-2 Compact完成菌株鉴定及药敏分析.设计特异性单碱基延伸引物,结合多重聚合酶链反应(PCR)扩增与核酸质谱技术,在同一反应体系中检测碳青霉烯酶基因型特征峰,分析核酸质谱结果与PCR结果的一致性.结果 56株CRKP中KPC、NDM、OXA-232及KPC+NDM联产型菌株各14株.各亚型特征峰无交叉干扰;核酸质谱对KPC、OXA-232及KPC+NPM联产耐药菌株检测结果与PCR结果的一致率为100.00%,仅误将1株NDM菌株划分为NDM+OXA联产型菌株,总体检测一致率为98.21%(55/56).药敏试验结果显示,KPC及NDM型菌株对亚胺培南耐药率为100.00%,而OXA-232菌株对亚胺培南耐药率为0.结论 核酸质谱技术可高效、精准鉴定CRKP碳青霉烯酶基因型,与PCR结果高度一致,为临床快速分型及耐药监测提供了可靠工具.
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