摘要目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)ATP酶分泌途径钙离子转运蛋白2(ATPase secretory pathway Ca2+transporting 2,ATP2C2)反义 RNA1(ATP2C2 antisense RNA 1,ATP2C2-AS1)对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 采用qRT-PCR对人正常成骨细胞(hFOB 1.19)和人骨肉瘤细胞系(Saos-2、U2OS、143B和HOS)中ATP2C2-AS1的表达水平进行定量分析.骨肉瘤细胞Saos-2分别转染ATP2C2-AS1 siRNA(si-ATP2C2-AS1)或其阴性对照(si-NC),同时转染ATP2C2-AS1过表达质粒(oe-ATP2C2-AS1)或其阴性对照(Vector).评估转染效率后,向转染oe-ATP2C2-AS1或Vector的Saos-2细胞加入磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)抑制剂NVP-BEZ235.上述处理细胞增殖活性通过CCK-8法测定,细胞凋亡水平采用流式细胞术检测.Western blot实验分析凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2和Cleaved-caspase-3)以及PI3K/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路相关蛋白的表达水平.结果 与hFOB 1.19细胞相比,人骨肉瘤细胞Saos-2、U2OS、143B和HOS细胞系中ATP2C2-AS1表达水平均显著升高(均P＜0.001),其中Saos-2细胞的表达量最高.沉默ATP2C2-AS1可导致Saos-2细胞增殖活性降低,细胞凋亡增加,下调PI3K(p85α)、Bcl-2蛋白表达及p-Akt/Akt与p-mTOR/mTOR蛋白比值,上调Bax和Cleaved-caspase-3蛋白表达(均P＜0.05).相反,过表达ATP2C2-AS1提高Saos-2细胞增殖活性,抑制凋亡,上调PI3K(p85α)、Bcl-2 蛋白表达及 p-Akt/Akt 与 p-mTOR/mTOR蛋白比值,下调 Bax 和 Cleaved-caspase-3 蛋白表达(均 P＜0.05).NVP-BEZ235干预显著抑制ATP2C2-AS1过表达对Saos-2细胞的增殖促进作用,并诱导细胞凋亡.结论 ATP2C2-AS1可能通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路促进骨肉瘤细胞增殖,抑制其凋亡.