黑色素瘤细胞裂解物通过巨噬细胞抗原递呈诱导淋巴细胞活化体外实验
Melanoma Cell Lysate Induced Lymphocyte Activation by Macrophages Antigen Presentation in Vitro
摘要目的 探讨巨噬细胞对黑色素瘤细胞裂解物抗原的抗原递呈作用.方法 反复冻融法制备小鼠B16F10 黑色素瘤细胞裂解物抗原,根据其浓度的不同分为4 组:对照组、25 μg/mL组、50 μg/mL组和100 μg/mL组,分别作用于C57BL/6 小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测巨噬细胞MHC-Ⅰ分子H-2Kb/H-2Db和MHC-Ⅱ分子I-A/I-E以及协同刺激分子CD80 和CD86 的表达.制备C57BL/6 小鼠免疫淋巴细胞,与上述巨噬细胞共培养,收集未贴壁淋巴细胞,再与B16F10 黑色素瘤细胞共培养,CCK8 法检测淋巴细胞增殖率和黑色素瘤细胞增殖抑制率.结果 几乎所有巨噬细胞均阳性表达H-2Kb/H-2Db,各组间差异无统计学意义(P>0.05);而与对照组相比,100 μg/mL组H-2Kb/H-2Db表达强度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,25 μg/mL组、50 μg/mL组和100 μg/mL组的I-A/I-E阳性表达率、CD80 和CD86 阳性表达率以及淋巴细胞对B16F10 黑色素瘤细胞的增殖抑制率增高,差异均有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,50 μg/mL组和100 μg/mL组的淋巴细胞增殖率增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 巨噬细胞对黑色素瘤细胞裂解物抗原具有抗原递呈作用,可诱导淋巴细胞的抗黑色素瘤免疫反应.
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