兔骨髓间充质干细胞的Gd-DTPA标记及MRI体外示踪
Gadolinium and fluorescent bi-functionally labeling and in vitro MR imaging of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells
摘要目的 探讨兔MSCs磁性标记及MRI体外示踪的可行性.方法 培养分离兔MSCs,以PEI-FluoR为载体,体外对MSCs进行双标记.标记后行荧光镜、电镜观察及生物学性状检测.应用1.5T MRI仪,对标记细胞进行SE序列T1WI及T2WI扫描及T1-mapping测量T1时间,并观察MRI上能显示标记MSCs的最小数目及标记后正常传代后MRI监测的持久性.结果 MSCs双标记后,标记效率为80%,细胞内可见荧光物质,电镜下Gd颗粒位于胞浆内.标记后24 h内标记细胞与未标记细胞间台盼蓝拒染率、标记后5 d内标记细胞与未标记细胞的MTT吸光度值差异无统计学意义.标记细胞凋亡指数为0.40%.未标记细胞为0.19%.未标记及标记细胞T1WI平均信号强度及T1时间分别为2166±167、(2445±21)ms,3162±350、(1404±129)ms(t=6.91、29.87,P<0.005).体外MRI上可监测到最低1X104个标记细胞,并可持续显示第3代标记细胞.结论 应用多聚胺载体对兔MSCs进行Gd-DTPA及荧光双标记安全、有效;MRI能示踪体外双标记的干细胞.
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