诱导性共刺激分子靶点用于小鼠佐剂诱导型关节炎模型的可行性

Feasibility of inducible costimulatory target in mice adjuvant-induced arthritis models

二维码有效期 120s

摘要目的观察诱导性共刺激分子(ICOS)靶点用于小鼠佐剂诱导型关节炎(AIA)模型的可行性.方法选取20只BALB/c小鼠,于右后爪分别注射等剂量完全弗氏佐剂(AIA组,n=10)或磷酸盐缓冲液(对照组,n=10),之后经尾静脉分别注射ICOS-IRD680 mAb探针(AIA组)或IgG-IRD680 mAb探针对照组,比较24及48 h后2组近红外荧光成像右爪与左爪荧光强度比值;提取小鼠总RNA行转录组测序,筛选并分析差异表达基因.针对对照组提取脾脏原代T细胞并分选磁珠阴性T细胞,以佛波酯/离子霉素刺激、诱导活化T细胞形成,检测其表面ICOS蛋白表达水平,并进行安全性评价.结果相比对照组,AIA组ICOS基因表达显著上调、T细胞占比增高,FoxP3+调节性T细胞、CD8+T细胞及CD4+T细胞中ICOS分布较多.对照组分选磁珠阴性T细胞前、后CD3+T细胞纯度分别为65.31％和90.14％;其中,ICOS蛋白阳性小鼠CD4+T细胞在活化前、后占比分别为7.14％及31.20％,且活化CD4+T细胞ICOS蛋白平均荧光强度(586±25)显著高于未活化者(161±31)(t=25.390,P＜0.001).注射探针后24及48 h,AIA组右爪/左爪荧光强度比值均高于对照组(t=34.600、P＜0.001;t=23.380、P＜0.001).相比对照组,AIA组小鼠心、肝、肾组织未见明显病理改变,且组间血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肌酐无明显差异(P均＞0.05).结论 ICOS靶点用于小鼠AIA模型安全、可行.