换一批3种不同fHbp重组蛋白的免疫效力对比研究
Comparative Study of Immune Efficacy of Three Different fHbp Recombinant Proteins
摘要目的 对脑膜炎球菌(Neisseria meningitidis,Nm)H因子结合蛋白(factor H-binding protein,fHbp)、奈瑟氏菌基因组抗原2091(GNA2091)-fHbp和fHbp-Fc 3种重组蛋白的免疫效力进行对比研究,评价其作为疫苗候选成分的可行性.方法 分别合成fHbp、GNA2091和人源可结晶段(fragment crystallizable,Fc)蛋白编码基因序列,连接到pET-28a(+)原核表达载体上,克隆构建pET-fHbp、pET-GNA2091-fHbp和pET-fHbp-Fc重组表达质粒,分别转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达3种重组蛋白,经镍柱亲和色谱纯化后免疫小鼠,收集血清,并通过间接酶联免疫吸附实验(ELISA)和血清杀菌实验(serum bactericidal assay,SBA)对重组蛋白免疫效力进行评价.结果 成功构建了 pET-fHbp、pET-GNA2091-fHbp和pET-fHbp-Fc 3种重组表达质粒,并表达纯化出相对分子质量分别为28 × 103、50 × 103和58 × 103的重组蛋白,其纯度分别为94.26％、96.76％和90.8％.fHbp、GNA2091-fHbp和fHbp-Fc免疫血清抗体几何平均滴度分别为1∶722、1∶6 502和1∶4 190,84 d后抗体滴度仍维持在较高水平,其中融合蛋白杀菌效力SBA均高于单独fHbp组.结论 3种重组蛋白均具有一定的免疫原性,其中2种融合重组蛋白的免疫效果更好,为B群脑膜炎球菌疫苗的开发提供了数据支持.
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分类号
R392（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.11669/cpj.2025.12.008
发布时间
2025-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
沈阳市科技计划项目（F16-183-9-0）
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