紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响
Effect of Butein on the Biological Activity of Co-Cultured Human Melanoma Cells A375 and Human Immortalized Keratinocytes HaCaT
摘要目的 探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375 与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响.方法 建立A375 细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5,1.0,5.0 μg/L).采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;采用流式细胞仪检测细胞的周期分布和线粒体膜电位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测干细胞因子(SCF)和其受体c-Kit,以及小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞酪氨酸酶相关蛋白 1,2(TRP-1,TRP-2)及SCF,c-Kit,MITF的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,中、高剂量组细胞的增殖率均显著升高(P<0.01);与对照组比较,各剂量组G0/G1 期细胞比例均显著降低,S期和G2/M期细胞比例均显著升高(P<0.01),高线粒体膜电位细胞比例均显著升高(P<0.05 或P<0.01),SCF,c-Kit,MITF的mRNA表达水平及SCF,c-Kit,MITF,TRP-1,TRP-2 的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05 或P<0.01).结论 紫铆花素可能通过调节SCF,c-Kit,MITF的表达而影响A375 细胞与HaCaT细胞共培养细胞的增殖、细胞周期和线粒体膜电位等细胞生物学活性.
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