换一批miRNA-4465靶向Wnt5A调控对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响
Effects of Regulation of miRNA-4465 Targeting Wnt5A on the Proliferation,Migration and Invasion of Glioma Cells
摘要目的 探讨miRNA-4465(miR-4465)对胶质瘤细胞增殖、侵袭及迁移的影响及其作用机制.方法 采用miR-4465 模拟物(mimic)处理U118 和U87 细胞,检测细胞生物活性.双荧光素酶报告基因实验评价miR-4465 和Wnt5A的结合情况.采用siRNA和miR-4465 抑制剂(inhibitor)分别抑制Wnt5A和miR-4465 的表达,采用CCK-8 法、细胞克隆实验、伤口愈合实验和Transwell实验,检测细胞的增殖、迁移、侵袭能力.复制移植瘤裸鼠模型,评价miR-4465 过表达和抑制对其肿瘤生长的影响.结果 miR-4465 mimic显著抑制了U118 和U87 细胞增殖能力.双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-4465 与Wnt5A存在靶向调节作用.沉默Wnt5A可降低细胞的增殖、迁移、侵袭能力,miR-4465 被抑制后,细胞的增殖、迁移、侵袭能力均显著增强(P<0.05).此外,沉默Wnt5A可逆转miR-4465 抑制导致的细胞增殖、迁移、侵袭能力增强.体内实验结果显示,miR-4465 过表达抑制肿瘤生长和ki67 的表达,而miR-4465 被抑制后,肿瘤生长和ki67 的表达显著增强(P<0.05).结论 miR-4465 在胶质瘤中呈低表达,其过表达可抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力,其下游作用机制与Wnt5A通路有关.
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