换一批
换一批具有双层结构和负电荷屏障载体的构建及其基因转染
Fabrication of Double-decked Carrier with Negatively Charged Shielding for Gene Transfection
摘要用组氨酸分别修饰聚乙烯亚胺(PEI)和透明质酸,得到了聚乙烯亚胺-组氨酸(PEI-His)和透明质酸-组氨酸(HA-His).然后将PEI-His与增强型绿色荧光蛋白质粒DNA (pEGFP-N1)复合形成PEI-His/DNA复合物(PD复合物),并进一步在其表面吸附HA-His形成具有双层结构和负电屏障的(PEI-His/DNA)/HA-His复合物(HPD复合物),用于基因传递研究.透射电镜观察到HPD复合物为球形纳米粒子,水化后平均粒径约为142 nm,ζ电位为-28.9 mV.HPD复合物中加入10％胎牛血清后平均粒径为135 nm,ζ电位为-25.8 mV,提示其具有良好的血清稳定性.HPD复合物对pEGFP-N1的包载效率为(91.9+115)％,并可有效保护DNA不被DNase I降解.在PEI浓度5～20 μg/ml范围内,HPD复合物的细胞毒性明显低于PEI/DNA复合物,前者细胞存活率可维持在80％以上;同时,它可介导DNA进入细胞实现基因转染,转染效率为2.88％.
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关键词
基因载体聚乙烯亚胺透明质酸组氨酸pEGFP-N1基因转染gene carrierpolyethyleneiminehyaluronic acidhistidineplasmid enhanced green fluorescent protein-N1 (pEGFP-N1)gene transfection
分类号
R944.9
栏目名称
DOI
10.16522/j.cnki.cjph.2015.10.009
发布时间
2015-11-23
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