换一批
换一批恒河猴血清中预存抗AAV8衣壳总抗体检测方法的建立与确认
Establishment and Confirmation of a Method for Detection of Total Anti-capsid of AAV8 Antibodies in Serum of Rhesus Monkeys
摘要随着基于腺相关病毒(AAV)基因治疗的显著发展,一项重要的任务是开发简便、快速且可靠的检测AAV预存抗体的方法.该研究基于酶联免疫吸附试验(ELISA),将AAV8衣壳包被于96孔板,采用重组蛋白A/G为检测抗体,建立了一种简单、快速检测恒河猴血清中抗AAV8衣壳总抗体(TAb)的方法,并对其进行方法学验证.结果表明,该方法的乘法校正因子为1.08,确证临界值为29.5％;筛选和确证灵敏度分别为43.1、76.5ng/mL.1 000、100、50 ng/mL的阳性对照抗体可耐受AAV8滴度分别为1.25×1010、3.13×109、1.56×109 GC/mL.批内、批间变异系数(CV)≤20.0％.此外,本方法有足够的选择性和样本稳定性,可用于恒河猴血清中预存抗AAV8衣壳TAb的检测.
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