基于慢病毒的猴痘假病毒系统设计与构建及其评价抗猴痘抗体中和活性的应用
Design and Construction of a Lentivirus-based Monkeypox Pseudovirus System and Its Application to Evaluation of Neutralizing Activity of Anti-MPXV Antibodies
摘要猴痘病毒表面的A35R和M1R抗原在介导病毒入侵过程中发挥重要生物学功能,也是潜在的疫苗设计与中和抗体治疗的重要靶点.该研究通过分子克隆技术分别构建A35R或M1R与严重急性呼吸系统综合征(SARS)冠状病毒表面棘突蛋白(S)的介导膜融合的S2结构域融合蛋白表达载体(A35R-S2或M1R-S2),并用融合蛋白替代慢病毒包装系统的包膜蛋白成分,在人胚肾细胞(HEK-293T细胞)里将插入萤光素酶报告基因的慢病毒载体质粒包装到慢病毒中,形成同时包膜展示A35R-S2或M1R-S2和基因组上载有萤光素酶的工程化慢病毒.体外感染试验证实,该工程化慢病毒可有效侵染HEK-293T细胞及非洲绿猴肾细胞(Vero-E6细胞),A35R和M1R特异性抗体可显著抑制工程化慢病毒的感染活性.综上所述,基于猴痘表面抗原-S2融合包膜蛋白的技术平台可包装出模拟猴痘感染的猴痘假病毒,并可作为猴痘病毒治疗性抗体候选药物的高通量筛选及疫苗免疫效果初步评估的新型工具.
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