换一批稳定整合靶向EGFL7基因的shRNA载体的胶质瘤细胞系的建立
Development of Stable Glioma Cell Line Expressing shRNA Targeting EGFL7 Gene
摘要目的 构建针对EGFL7基因的特异性RNA干扰载体,建立稳定转染该干扰载体的人胶质瘤细胞系.方法 根据EGFL7基因的编码序列设计并合成针对EGFL7基因的特异性shRNA,将其克隆人pSilencer 3.1-H1 neo载体中,重组载体经脂质体Lipofectamine<'TM> 2000介导转染胶质瘤细胞株U251;转染细胞经G418筛选,采用Western blot方法在蛋白水平检测筛选出的G418抗性的克隆细胞.结果 酶切鉴定和测序证实,成功构建了靶向EGFL7基因的shRNA真核表达载体pSilencer-shEGFL7,并获得了稳定表达靶向EGFL7基因的shRNA的胶质瘤细胞株.结论 EGFL7基因特异性RNA干扰载体能够显著抑制EGFL7基因在U251细胞中的表达,这为进一步研究EGFL7在胶质瘤细胞系U251中的生物学功能和作用机制奠定了基础.
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2011-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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