miR-548a-3p通过调节NLRP3炎性小体在脓毒症致ARDS中的机制研究
Study of the mechanism of miR-548a-3p in sepsis-induced ARDS by regulating NLRP3 inflammasome
摘要目的 探究微小RNA(miR)-548a-3p通过调节NLRP3 炎性小体在脂多糖诱导脓毒症致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的机制.方法 选取 45 只小鼠按随机数表法分为对照组、ARDS组和ARDS+miR-548a-3p agomir组,每组各 15 只,通过鼻腔内滴入 6 mg/kg的脂多糖至肺构建ARDS模型.为提高miR-548a-3p的水平,腹腔内注射miR-548a-3p agomir(300 μg),检测各组的HE染色情况、肺组织损伤评分、白细胞介素(IL)-1β、IL-18、NLRP3 蛋白水平.通过双荧光素酶报告验证miR-548a-3p和NLRP3 的靶向关系.通过转染miR-548a-3p mimic过表达miR-548a-3p,通过RT-qPCR和Western blot检测各组NLRP3 mRNA和蛋白水平以及IL-1β和IL-18 水平.结果 ARDS组的肺组织损伤评分、IL-1β、IL-18 和NLRP3 蛋白表达水平均显著高于对照组和ARDS+miR-548a-3p agomir组,差异有统计学意义(P<0.05).双荧光素酶报告实验证实NLRP3 是miR-548a-3p的靶基因,miR-548a-3p mimic组细胞的NLRP3 mRNA和蛋白、IL-1β/pro-IL-1β和IL-18 的表达水平低于miR-548a-3p NC组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-548a-3p可通过靶向抑制NLRP3 蛋白抑制NLRP3 炎性小体的激活,从而缓解ARDS炎性损伤.
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