换一批Flag和GFP双标记的BKCa通道α亚基表达质粒的构建、鉴定和序列分析
Construction and identification of BKCa α subunit expression plasmid with double labeling of Flag and GFP
摘要目的:采用重叠PCR法构建表达质粒,为下一步研究通道功能奠定基础.方法:在已有编码大电导钙激活钾通道(BKCa)通道α亚单位的表达质粒pcDNA3.1-hSlo的基础上,采用重叠PCR法构建Flag和GFP双标签标记的表达质粒pcDNA3.1-Flag-hSlo-GFP(Flag-hSlo-GFP).结果:构建的表达质粒Fag标签插入BKCa通道的S1-S2胞外环,GFP标签连接BKCa通道的胞内C末端,测序结果证实质粒构建成功.结论:成功构建BK通道基因表达质粒Flag-hSlo-GFP,重叠PCR能够很好的用于长片段基因扩增和插入片段的实验.
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关键词
大电导钙激活钾通道重叠PCR基因工程large conductance calcium activated potassium channelsoverlapping PCRgene cloning
医学主题词
质粒(Plasmids)大电导钙激活钾通道(Large-Conductance Calcium-Activated Potassium Channels)序列分析(Sequence Analysis)基因(Genes)工程(Engineering)
栏目名称
DOI
10.13459/j.cnki.cjap.2016.03.024
发布时间
2016-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31300948）
泸州市-四川医科大学联合资助项目（2015LZCYD-S03）
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