结核特异性CD4+α/βTCR四聚体细胞株筛选技术的建立和应用
Establishment and application of cell strains to screen specific CD4+α/βTCR tetramers
摘要目的应用不同的 MTB 多肽以及不同的 HLA-DR 基因构建的膜表面表达结核抗原肽/HLA-DR 复合物的 S2恒定细胞株,即人工 APC 筛选、鉴定结核特异性 CD4+α/βTCR 四聚体。<br> 方法以 PE 标记的 CD4+α/βTCR 四聚体、FITC 标记的抗 HLA-DR 抗体(L243),分别与未诱导表达或 CuSO4诱导表达后的膜表面表达结核抗原肽/HLA-DR 的果蝇 S2恒定细胞株,以及与无多肽或结合有结核多肽的、表达HLA-DR 的 S2细胞株共孵育,流式细胞技术检测分析TCR 四聚体与各种细胞株结合率的差异。<br> 结果 TCR 四聚体6M、6N 均与2#细胞株,即C5/HLA-DRB1*0404(1.73%、5.93%)等具有较高的阳性结合率;结核抗原肽孵育后,一些人工 APC 的四聚体阳性结合率有所提高;所筛选的9个 TCR 四聚体均与2#细胞株有较高的结合率。<br> 结论膜表达结核抗原肽/HLA-DR 的 S2细胞株,可以应用于结核特异性 CD4+α/βTCR 四聚体的筛选、鉴定;构建的9个 CD4+α/βTCR 四聚体均为结核特异性。
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