换一批以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒的构建
Construction of a single-cycle infectious influenza virus with the Gluc reporter system
摘要目的：构建以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒用于药物作用机制的快速鉴别。方法通过使用分泌型荧光素酶（Gluc）序列替代流感病毒 HA基因，并利用表达质粒反式提供 HA蛋白，借助甲型流感病毒 WSN反向遗传学产毒系统，构建带有报告系统的单轮感染流感病毒。结果首轮接种单轮感染流感病毒的细胞上清中可以检测到 Gluc信号，但检测不到病毒滴度，而在第二轮感染的细胞上清中检测不到 Gluc信号，表明该单轮感染病毒在感染过程中能够分泌 Gluc蛋白并且不能产生具有感染性的子代病毒颗粒。通过对复制动力学和时相的观察，明确了单轮感染病毒的生活周期，同时结合4种已知作用机制的抗流感药物的阻断实验结果，证明该系统可以用来快速、有效地鉴别药物的作用机制。结论成功构建了以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒，该系统可以用于抗病毒药物作用机制的快速鉴别。
更多相关知识
关键词
流感病毒 A型药物评价,临床前单轮感染病毒Gluc报告基因Influenza A virusDrug evaluation,preclinicalSingle-cycle infectious virusGluc reporter
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1673-713X.2016.04.003
发布时间
2016-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81401675）
- 浏览210
- 被引0
- 下载7
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
