猪苓菌核自噬相关基因 ATG8的克隆及表达分析
Cloning and expression analysis of a autophagy-related protein 8 encoding gene in Polyporus umbellatus
摘要目的:克隆分离猪苓自噬相关基因 ATG8,并探讨其在猪苓防御蜜环菌入侵过程中的作用。方法以猪苓菌核为材料,采用 RT-PCR 方法得到自噬相关基因的开放读码框全长,并利用荧光定量 PCR 检测该基因在不同猪苓菌核部位的表达量。结果该基因开放读码框为387 bp,编码128个氨基酸;该蛋白分子量为14.838 kD,理论等电点为5.85。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示 PuATG8与蚁巢伞属(termitomyces sp.)亲缘关系最近,与皱革菌(Punctularia strigosozonata)、密褐褶孔菌(Gloeophyllum trabeum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)有较高的同源性。PuATG8为ATG 家族同源基因。荧光定量 PCR 结果表明,PuATG8在未被蜜环菌侵染的猪苓菌核及被蜜环菌侵染的菌核中都有表达,其中被侵染部分的表达量显著上调。结论 PuATG8可能参与了猪苓菌核的防御反应。
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