摘要目的 比较不同荧光标记检测抗体组合与不同抗凝剂对检测食蟹猴外周血T淋巴细胞亚群的影响,为相关检测提供方法参考.方法 取肝素钠抗凝猴血50μl分别与两组荧光检测抗体PerCP-CD3/FITC-CD8/PE-CD4(检测抗体组合1)和PerCP-CD3/FITC-CD4/PE-CD8(检测抗体组合2)孵育,流式细胞仪测定CD3+CD4+和CD3+CD8+淋巴细胞百分比和平均荧光强度(MFI),并计算CD3+CD4+和CD3+CD8+淋巴细胞比值,比较不同荧光标记抗体组合检测食蟹猴外周血T淋巴细胞亚群的结果.取肝素钠和乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝猴血各50μl分别与上述两组荧光检测抗体组合进行孵育,测定CD3+CD4+和CD3+CD8+淋巴细胞百分比和MFI,计算这两种淋巴细胞亚群比值,比较不同抗凝剂对食蟹猴外周血T淋巴细胞亚群检测结果的影响.结果 ⑴肝素钠抗凝猴血荧光检测抗体测定T淋巴细胞亚群的结果显示,FITC标记抗CD4抗体检测到的CD4+T淋巴细胞百分比和MFI均显著低于PE标记抗CD4抗体检测到的CD4+T淋巴细胞百分比和MFI,同样,FITC标记抗体检测到的CD8+T淋巴细胞百分比和MFI均显著低于PE标记抗体检测到的相应结果,应用检测抗体组合2的CD3+CD4+/CD3+CD8+淋巴细胞比值显著低于应用检测抗体组合1的,雌、雄动物均出现前述结果,雌性动物的变化更为显著.⑵应用抗体组合1检测时,与肝素钠抗凝组相比,EDTA-K2抗凝剂组CD3+CD4+淋巴细胞百分比显著增加、CD3+CD8+淋巴细胞百分比和CD8+MFI显著降低,CD3+CD4+/CD3+CD8+淋巴细胞比值显著增加;应用抗体组合2检测时,仅发现EDTA-K2抗凝组比肝素钠组CD8+MFI显著降低,未见其他有意义的变化.结论 FITC标记抗CD4抗体和抗CD8抗体检测相应细胞百分比和荧光强度均小于PE标记的抗体,在应用这两种荧光标记抗体进行T淋巴细胞亚群检测时应注意对试验结果的影响和合理分析.使用EDTA-K2抗凝对食蟹猴外周血CD8+淋巴细胞测定结果有明显影响,在进行食蟹猴T淋巴细胞亚群测定时宜使用肝素钠抗凝剂.