换一批实时荧光定量PCR法检测外源性DNA在重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的残留
Detection of exogenous DNA residues in recombinant type Ⅲ humanized collagen lyophilized fibers by real-time fluorescence quantitative PCR
摘要目的 对实时荧光定量PCR(qPCR)法检测重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的外源性DNA残留量进行探究和分析,确定该方法用于DNA质量控制的可行性.方法 采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒(磁珠法)提取DNA,利用E.coli残留DNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行扩增反应,绘制标准曲线,建立重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的qPCR检测方法.结果 对8批重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维进行测定,外源性DNA残留量在0.03～300 pg/μl内,重复性良好,均远低于每剂10 ng,线性良好(R2>0.99),回收率均在50％～150％之间.结论 该方法可用于重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的定量测定.
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DOI
10.3969/j.issn.1673-713X.2023.01.006
发布时间
2023-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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