脐带间充质干细胞体内示踪技术的建立及在BALB/c裸鼠体内生物分布研究
Establishment of the method for stem cells labeling and tracking of umbilical cord-mesenchymal stem cells in BALB/c nude mice
摘要目的 建立适用于脐带间充质干细胞(UC-MSC)标记和体内示踪技术,并考察UC-MSC在BALB/c裸鼠体内分布特征.方法 采用DiR染料标记脐带间充质干细胞,系统评价荧光染料DiR标记对UC-MSC活率、形态、表面标志物、细胞周期等影响以及进行动物体内示踪的可行性.在此基础上将标记的UC-MSC尾静脉注射BALB/c裸鼠,剂量为3×106个/只,利用活体成像技术、免疫荧光等方法检测UC-MSC在BALB/c裸鼠体内的分布代谢情况.结果 DiR在5μg/ml浓度下标记5 min,干细胞标记率高,且对细胞形态、细胞活性、表面标志物、细胞周期均无明显影响;尾静脉注射后UC-MSC迅速分布在肺脏和肝脏,随后在脾脏等脏器分布.移植后30 d活体成像和免疫荧光方法均已检测不出UC-MSC.结论 DiR可成功标记UC-MSC并对其多种生物学指标无明显影响;UC-MSC回输小鼠后,在体内不会广泛分布和长期存续,具有较好的临床前安全性.
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