摘要目的:应用转录组学和代谢组学,分析预测温肾阳方(WSY)治疗慢性肾脏病(CKD)肾阳虚证的关键信号通路,并结合动物实验探究其对CKD肾阳虚证大鼠的保护作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/丙酮酸激酶M2(PKM2)信号通路的调节作用.方法:将58只SD大鼠,随机分为正常组10只,造模组48只;造模组给予阿霉素(DOX)尾静脉注射(4 mg/kg)构建CKD模型,在此基础上复合肌注氢化可的松(HYD)(10 mg/kg)构建CKD肾阳虚证模型;将成模动物随机分为DOX组、HYD组、真武汤(ZWT)组(5.55 g·kg-1·d-1)、WSY组(2.38 g·kg-1·d-1),每组12只;观察大鼠一般状况,检测24 h尿蛋白定量(24 h UPro);收集血清检测肾功能及其相关指标[血肌酐(Scr)、尿酸(UA)、血尿素(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)];采用HE染色、Mallory染色和透射电镜观察肾组织病理形态;借助转录组学和血清代谢组学预测关键信号通路;采用ELISA检测大鼠血清糖酵解代谢酶乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸果糖激酶-1(PFK-1)水平;采用免疫组织化学染色、Western Blot和Real-time PCR验证大鼠肾组织中HIF-1α、PKM2、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、B淋巴细胞肿瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白及mRNA表达.结果:与DOX和HYD比较,WSY大鼠一般状态改善,体质量、体温、肾脏指数显著提升(P＜0.01,P＜0.05),血清Scr、UA、BUN含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01),TP、ALB显著上升(P＜0.05,P＜0.01);病理染色显示肾脏损伤减轻,电镜观察发现肾小球基底膜节段性增厚减轻、足突融合减轻.转录组学和代谢组学分析结果显示,WSY治疗CKD肾阳虚证作用机制可能与HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程调控凋亡基因相关.ELISA结果显示,WSY大鼠血清中LDH、PFK-1较DOX和HYD水平显著降低(P＜0.01);免疫组织化学染色、Western Blot和Real-time PCR结果显示,与DOX和HYD比较,ZWT、WSY大鼠肾组织HIF-1α、PKM2、GLUT1、Bax蛋白和mRNA表达降低(P＜0.05,P＜0.01),Bcl-2蛋白及mRNA表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:WSY可以保护CKD肾阳虚证大鼠肾功能,改善肾脏损伤,其机制可能是通过调控HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程,影响Bcl-2/Bax线粒体凋亡途径,从而延缓CKD疾病进展.