圣愈汤对气血两虚型亚健康模型小鼠免疫调节作用机制研究
Mechanism study on the immunomodulatory effect of Shengyu Decoction on sub-healthy model mice with Qi and blood deficiency
摘要目的:探讨圣愈汤对气血两虚型亚健康模型小鼠免疫调节作用机制研究.方法:采用环磷酰胺注射法建立气血两虚型亚健康小鼠模型,乌鸡白凤丸组给予乌鸡白凤丸(4.00g·kg-1)、圣愈汤低剂量组给予圣愈汤(0.25g·kg-1)、圣愈汤高剂量组给予圣愈汤(0.50g·kg-1),连续给药7 d后对小鼠进行负重游泳和水转轮实验,检测红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)、人工计数网织红细胞(reticulocytes,Ret)的水平,运用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测白细胞介素(interleukin)-2(IL-2)、IL-4、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)水平,对小鼠脾脏苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)染色病理学观察,并通过蛋白免疫印迹(Western blot)法检测小鼠脾脏中叉头框蛋白3(forkhead box P3,Foxp3)、视黄酸相关孤儿受体γt(retinoid-related orphan receptor γt,ROR-γt)、核因子 κB抑制因子 α(nuclear factor κB inhibitor α,IκB-α)、核因子-κB p65(nuclear factor κB p65 subunit,NF-κBp65)蛋白的表达水平.结果:与模型组相比,圣愈汤高剂量组力竭游泳时间和水转轮停留时间显著延长(P<0.01),且HGB水平显著升高(P<0.05),RBC、Ret水平显著升高(P<0.01),表明圣愈汤对恢复机体耐力气血具有良好的作用;与模型组比,圣愈汤组脾脏指数降低,IL-2、TNF-α水平显著下降(P<0.01),IL-1β、IL-6水平显著上升(P<0.05),表明圣愈汤对机体炎症因子减少,免疫系统恢复具有一定作用;此外,观察病理切片发现,与模型组比,乌鸡白凤丸组与圣愈汤高剂量组可显著改善小鼠脾脏组织红髓和白髓区充血、边缘模糊、中性粒细胞渗出等病理现象;检测炎症因子相关蛋白的表达发现,圣愈汤高剂量组Foxp3蛋白、ROR-γt蛋白、IKB-α蛋白表达水平显著上调(P<0.01).结论:圣愈汤对气血两虚型亚健康模型小鼠具有显著的益气补血和免疫调节作用,其作用机制可能与Janus激酶/信号转导及转录激活蛋白(JAK/STAT)信号通路或核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路有关.
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