换一批
换一批2D-PAGE电泳和质谱分析筛选鼻咽癌中NESG1调控蛋白
2D-PAGE Electrophoresis and Mass Spectrography Screening for NESG-Regulated Protein in NPC
摘要[目的]利用蛋白质组学筛选抑癌候选基因NESG1在鼻咽癌中可能调控蛋白.[方法]提取NESG1稳定高表达的鼻咽癌3D8和对照鼻咽癌C6细胞蛋白,并采用双向凝胶电泳(2D-PAGE)技术进行有效分离,图像扫描后获得高分辨率的2D-PAGE图谱.选用差异蛋白质组学技术筛选差异蛋白位点,然后用肽质量指纹谱(PMn和数据库检索技术给予鉴定.荧光定量PCR和Western Blot验证差异基因表达水平.[结果]质谱分析显示,PKM2 、ERO1L和BCAS2在NESG1过表达的3D8细胞中表达下调,其下调倍数分别为-5.25,-3.65和-4.52倍.荧光定量PCR在mRNA水平验证了PKM2、ERO1L和BCAS2(-3.65、-3.42和-4.55倍)以及Westem Blot在蛋白水平验证了PKM2和ERO1L蛋白在3D8细胞中表达下调.[结论]PKM2、ERO1L和BCAS2可能是NESG1调控的靶基因,参与了NESG1介导的鼻咽癌生长抑制
更多相关知识
主题词
鼻咽肿瘤(Nasopharyngeal Neoplasms)蛋白(Egg White)蛋白质组学(Proteomics)电泳, 凝胶, 双向(Electrophoresis, Gel, Two-Dimensional)电泳(Electrophoresis)
分类号
R739.63
栏目名称
论著
发布时间
2012-10-29
基金项目
国家自然科学基金
广州市珠江科技新量计划
广东省育苗工程计划
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