换一批
换一批MALDI-TOF-MS结合引物延伸反应检测K-ras基因型方法的建立
Establishment and Application of Research Model for Screening the K-ras Alleles by MALDI-TOF-MS Coupled with Primer Extension Reaction Method
摘要目的:建立MALDI-TOF-MS结合引物延伸的方法检测K-ras基因12位密码子7种基因型的研究模型并探讨其应用价值.方法:以自行构建的K-ras质粒DNA为模板,经目的片断扩增,去磷酸化,再用两条未经修饰的普通引物,在dATP、ddTTP、ddCTP和ddGTP混和物存在的体系中进行引物延伸反应,最后用MALDI-TOF-MS检测引物延伸产物质荷比(m/z),得到质谱图,根据质谱图中各个峰的峰值进行基因分型研究结果:用MALDI-TOF-MS结合引物延伸的方法,可以准确区分7种不同基因型.该方法可同时对384份样品进行检测结论:MALDI-TOF-MS结合引物延伸的方法准确度高,反应体系稳定并具有快速、高通量、自动化的特点,可能成为肿瘤早期诊断的检测方法.
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栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1000-8179.2005.10.001
发布时间
2005-07-21
基金项目
福建省自然科学基金
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