UpIb启动子-Smac重组体促膀胱癌细胞凋亡的实验动物研究

pcDNA3.1 Containing the Smac Gene Controlled by the UpIb Promoter Increases Apoptosis of Bladder Cancer Cells in Animal Models

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摘要目的:探讨携带Smac基因的膀胱癌细胞特异性表达质粒pcDNA3.1-UpIb promoter-Smac用脂质体包裹后注射到实验动物瘤体内的表达及促癌细胞凋亡的效应.方法:将人膀胱癌细胞株BIU-87注射到Balb/c-nu/nu雄性裸鼠的皮下,构建膀胱癌皮下移植瘤模型.当移植瘤长至直径约0.5cm时.用脂质体将pcDNA3.1-UpIb promoter-Smae包裹后隔天1次连续3次注射到瘤体内.间隔1天后,连续3天瘤体内注射适量丝裂霉素C诱导凋亡.设三组对照:单用脂质体质粒组、单用丝裂霉素C组和空白组.RT-PCR检测瘤组织Smac mRNA的表达,免疫组织化学法检测瘤组织Smac蛋白的表达.苏木素伊红染色镜检、DNA Ladder带凝胶电泳分析和TUNEL-荧光标记检测观察瘤组织癌细胞的凋亡情况.结果:膀胱癌裸鼠移植瘤模型构建成功.瘤体内注射脂质体包裹的pcDNA3.1-UpIb promoter-Smac后,与未注射脂质体质粒的对照组比较,Smac的表达增强约2.1倍;先注射脂质体质粒后丝裂霉素C处理和单用丝裂霉素C处理的瘤组织均可见典型的凋亡细胞,但前者的凋亡率为49.8%,显著高于后者的23.5%(P＜0.01).结论:膀胱癌裸鼠移植瘤模型瘤体内直接注射脂质体包裹的pcDNA3.1-UpIb promoter-Smae后,所携带的Smac基因能够在瘤组织中有效表达.并对丝裂霉素C诱导的瘤细胞凋亡有显著的促进作用.该质粒配合丝裂霉素C等凋亡诱导药物的应用,可望为膀胱癌的靶向基因治疗提供一新的治疗模式.