Gelsolin表达下调降低鼠源肝癌细胞的侵袭能力
Down-regulation of Gelsolin Decreases the Invasive Ability of Mouse Heptocarcinoma Cell lines
摘要目的:研究高低淋巴道转移力细胞株Hca-F(淋巴道转移>80%)和Hca-P(淋巴道转移<30%)细胞中gel-solin的表达及其对Hca-F细胞侵袭能力的影响,阐明gelsolin在肝癌淋巴道转移过程中发挥的作用.方法:应用荧光差异双向凝胶电泳技术及质谱定量和鉴定gelsolin在Hca-F细胞和Hca-P细胞中的表达;构建pSilencer-shR-NA-gelsolin表达载体,稳定转染Hca-F细胞并获得gelsolin的表达稳定下调的Hca-F细胞株,同时建立稳定转染psilencer-无关序列Hca-F细胞株作为对照,在mRNA水平和蛋白水平检测干扰后gelsolin的表达;Transwell小室体外侵袭试验观察下调gelsolin表达后对Hca-F细胞侵袭能力的影响.结果:Gelsolin基因在Hca-F细胞中表达高于是Hca-P细胞(F/P=1.7);获得gelsolin稳定下调的Hca-F细胞株,RT-PCR和Western Blot分析结果表明在稳定转染Hca-F细胞中,gelsolin在基因水平和蛋白水平的表达明显下调;在体外侵袭实验中,Hca-F细胞、对照组细胞、干扰组细胞穿过人工基底膜的细胞在570nm处的吸光度分别为0.2007±0.0129、0.2236±0.0446和0.1557±0.0051;表明下调gelsolin蛋白表达后,干扰组细胞穿过人工基底膜的细胞吸光度显著降低(P<0.05).下调Hca-F细胞中gelsolin的表达后,转移的肿瘤细胞数量减少,癌细胞的侵袭能力下降.结论:通过抑制gelsolin基因和蛋白的表达,可以降低鼠源肝癌细胞Hca-F侵袭能力的作用,揭示gelsolin在肝癌的淋巴道转移过程中发挥着重要的作用.
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