siRNA抑制Sema4C基因表达对人乳腺癌细胞恶性行为的影响

The Effect of Specific Inhibition of Semaphorin4C(Sema4C)Gene Expression by Small Interfering RNA on the Malignant Behavior of Human Breast Cancer Cell Line MDA-MB-231

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摘要目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制轴突导向蛋白分子(Semaphorin4C,Sema4C)基因的表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外迁移、侵袭及增殖的影响,并初步探讨其作用机制.方法:根据Sema4C基因设计序列特异性的siRNA(Sema4C-siRNA),在脂质体介导下转染MDA-MB-231细胞,Western blot方法检测基因封闭效应,利用细胞划痕实验、Transwell小室侵袭实验及CFSE流式细胞仪方法检测细胞转染前后迁移、侵袭及增殖能力的变化,Western blot检测磷酸化AKT(p-AKT)在转染前后细胞中表达的变化.结果:转染Sema4C-siRNA 72小时后,乳腺癌MDA-MB-231细胞株(MDA-MB-231/Si)Sema4C蛋白表达明显下降.与未转染细胞MDA-MB-231相比,MDA-MB-231/Si细胞体外迁移能力减弱,侵袭及增殖能力明显下降;p-AKT表达水平在MDA-MB-231/Si细胞中明显降低.结论:Sema4C-SiRNA转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞可下调细胞中Sema4C蛋白表达水平,Sema4C-SiRNA对MDA-MB-231细胞的体外迁移、侵袭和增殖有抑制作用,这可能与p-AKT的下调有关.