换一批膀胱癌EJ细胞的CD44异常糖基化及其单抗KMP1的生物学功能研究
Aberrant Glycosylation of CD44 in Oncogenesis of EJ Cells and Biological Effects of Anti-CD44 Monoclonal Antibody KMP1
摘要目的:研究EJ细胞单抗KMP1的结合抗原CD44的变化和KMP1对EJ细胞生物学功能的影响.方法:采用人膀胱癌EJ细胞株免疫BALB/c小鼠,获得单抗KMP1,免疫荧光检测KMP1的亲和性、结合部位及效价.流式细胞检测KMP1对膀胱癌细胞的特异性.免疫组化检测对膀胱癌组织的特异性.亲和层析分离纯化特异性抗原,检测抗原的氨基酸序列.糖基转化酶抑制剂和过碘酸氧化后分析抗原决定簇的理化性质改变.软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验检测KMP1对EJ细胞株的增殖和迁移功能的影响.结果:获得的单抗KMP1是IgG1,能与EJ、BIU-87、T24膀胱癌细胞和膀胱癌组织特异性结合,而与Lovo、HeLa、K562、HepG2、Jurkat、293、HCV29、人的红细胞和白细胞无结合性,也不能结合正常膀胱黏膜.其结合EJ细胞的抗原是异常糖基化的CD44,糖基转化酶抑制剂BG作用EJ细胞7d,KMP1对EJ细胞结合性降低,过碘酸氧化后Westernblot显示KMP1对CD44结合性降低,软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验结果示KMP1还能减弱EJ细胞的增殖和迁移功能.结论:膀胱癌的高复发性、易转移可能与出现异常糖基化的CD44高表达具有一定的相关性,KMP1可结合异常糖基化的CD44,并抑制EJ细胞的增殖和迁移.
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分类号
R734.2
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-8179.2011.13.003
发布时间
2011-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
昆明医学院研究生创新基金（2009D03）
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