换一批细胞因子诱导的杀伤细胞逆转耐顺铂肺腺癌细胞系A549/DDP 耐药性的研究
Cytokine-induced Killer Cells Modulate Cisplatin Resistance in the A549/DDP Cell Line
摘要目的:观察细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对耐顺铂(DDP)人肺腺癌细胞系A549/DDP的耐药逆转作用及其逆转A549/DDP耐药的可能机制.方法:A549/DDP与CIK细胞采用Transwell非接触共培养.四氮甲唑兰比色法(MTT法)验证A549/DDP的DDP耐药性及检测共培养前后A549/DDP对DDP耐药性的变化.RT-PCR法筛选A549与A549/DDP有差异表达的基因作为检测耐药性变化的观察指标,并检测共培养前后A549/DDP中基因表达水平的变化;Western blot检测A549及共培养前后A549/DDP中基因蛋白水平的变化.结果:A549/DDP的耐药系数为14.5,具有较强的DDP耐药性.RT-PCR筛选出A549与A549/DDP表达有差异的耐药相关基因为谷胱甘肽转移酶(glutathione-S-transferase,GST-π)基因、人类铜离子转运蛋白(human copper transporter 1,hCTR1)基因,A549/DDP中GST-π表达量明显增加,hCTR1表达量明显降低.与CIK细胞共培养后,A549/DDP对DDP的耐药性明显下降,共培养20h后耐药逆转倍数约为4.93倍,细胞内GST-π基因及蛋白水平的表达明显降低(P<0.05).结论:CIK细胞对A549/DDP有逆转DDP耐药的作用,其机制可能与下调GST-π基因及蛋白水平的表达有关.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-8179.2012.13.004
发布时间
2012-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
本文课题受天津市应用基础及前沿技术研究计划（(09JCZDJC20400)）
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