GTP结合蛋白4在肝癌中的表达及作用的初步研究

Expression of GTPBP4 in hepatocelluar carcinoma (HCC) tissues and preliminary study on the functions of the GTPBP4 gene

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摘要目的：探讨GTP结合蛋白4（GTP binding protein 4，GTPBP4）在肝癌（hepatocelluar carcinoma，HCC）组织中的表达及沉默GT?PBP4对人肝癌HepG2细胞增殖和周期影响。方法：收集南昌大学第二附属医院2014年3月至2015年2月24例新鲜临床HCC组织及配对癌旁组织标本，采用Western blot检测GTPBP4在组织中的表达差异；在HepG2细胞中用慢病毒介导的RNAi干扰技术沉默该基因，运用荧光显微镜观察感染效率，Western blot、RT-qPCR检测沉默效果；CCK-8实验、流式细胞仪观察细胞增殖、细胞周期变化。结果：1）Western blot结果显示GTPBP4在21例（87.5%）HCC组织标本中明显高表达（P<0.0001）；2）用荧光显微镜观察显示慢病毒成功感染HepG2细胞后，发现90%细胞表达GFP；LV-GTPBP4-RNAi组GTPBP4在RNA水平、蛋白水平较对照组分别下降约70%和67%；3）GTPBP4基因沉默96 h后，LV-GTPBP4-RNAi组增殖能力抑制，抑制率约54.51%；LV-GTPBP4-RNAi组G0/G1期增多，S期减少，细胞周期发生停滞。结论：GTPBP4在HCC组织中高表达，利用RNAi干扰GTPBP4基因表达后，人肝癌HepG2细胞增殖能力明显下降，细胞周期停滞于G0/G1期，但是具体分子机制不明。