摘要目的:探讨激动性CD40抗体中单链抗体(CD40ScFv)和单克隆抗体(CD40mAb)抑制小鼠乳腺癌细胞生长情况及对癌组织中Th1和Th2平衡的改变,分析通过调节Th1/Th2平衡达到抗肿瘤作用的机制.方法:将含CD40ScFv基因片段的重组质粒转化至Rosetta大肠杆菌中,诱导表达并经纯化后获得有功能的CD40ScFv蛋白,行SDS-PAGE和Western blot检测.体外培养小鼠乳腺癌4T1细胞,在Balb/C小鼠皮下成瘤建立模型,分为CD40ScFv组、CD40mAb组和生理盐水组(NS组),分别给予CD40ScFv、CD40mAb和生理盐水,观察各组小鼠肿瘤体积的变化.取出瘤体组织,ELISA法检测肿瘤组织上清中IL-12的浓度.提取肿瘤组织浸润淋巴细胞(TILs),应用流式细胞技术检测TILs中Th1与Th2的比例.结果:诱导表达的CD40ScFv鉴定表达成功,分子大小约为27 KDa,蛋白纯化后经BCA测定浓度为1.12 mg/mL.CD40ScFv组与CD40mAb组肿瘤大小分别为(3.044±0.239)cm3与(2.749±0.261) cm3,均小于NS组的(3.933±0.326)cm3,差异具有统计学意义(P<0.05).CD40ScFv组、CD40mAb组肿瘤组织中IL-12浓度分别为(396.27±48.13)pg/mL、(457.63±58.37)pg/mL,均显著高于NS组的(79.51±14.97)pg/mL,差异具有统计学意义(P<0.05).CD40ScFv组与CD40mAb组的Th1/Th2细胞比值分别为6.32±0.87与5.54±0.71,均显著高于NS组的1.79±0.38,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:激动性CD40抗体在体内通过调节Th1与Th2的比例,发挥抑制肿瘤生长的作用,其中通过促进DC活化后分泌IL-12是影响肿瘤微环境中Th1/Th2平衡的重要机制之一.